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Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型

¥1800
货号:Y4151-20ML
品牌:DIB
规格:
  • 20 mL
数量:

Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型可作为培养上皮细胞、肝细胞和成纤维细胞等细胞的理想底物,用于包被培养皿表面以促进细胞贴壁和增殖,或作为三维培养基质模拟体内细胞外基质环境,为细胞立体生长和组织构建提供支持

 

产品信息
 

产品名称产品编号规格
Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型Y4151-2ML2 mL
Y4151-20ML20 mL


 

 

产品描述

 

胶原蛋白I型是人体中最丰富的蛋白质,占总蛋白质的30 %,由不断重复G-X-Y的三条多肽链(两个α1链和一个α2链)组装成一种三链螺旋结构,为骨骼、肌腱、韧带和皮肤等组织提供强度和弹性。胶原蛋白Ⅰ型在细胞生长、分化、附着和细胞迁移中起着关键作用,因此许多体外实验方法,如细胞嵌入胶原蛋白凝胶、水凝胶制备、黏附实验等,已被开发用于研究细胞与细胞外基质相互作用的各个方面。

 

Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型可作为培养上皮细胞、肝细胞和成纤维细胞等细胞的底物,用于包被培养皿表面或为细胞的三维培养提供基质。

Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型为溶于0.02 M 乙酸,浓度为5 mg/mL的无菌制品。

 

储存与运输
 

冰袋运输,2-8 ℃避光保存,12个月有效期;切勿冻存。

 

产品组成
 

Component NumberComponentG4140
Y4151Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型2 mL20 mL
产品说明书1 份

 

产品使用
 

1. 细胞培养皿的表面包被

可根据不同的实验需求选择蛋白浓度,建议包被浓度为5 μg/cm2。

(1) 用0.02 M 乙酸溶液将胶原蛋白稀释至50 μg/mL,参考表 1 包被液推荐用量表添加到培养器材中。

(2) 确保胶原蛋白稀释液均匀地铺在培养表面,室温孵育1小时。小心地吸出溶液,用无菌PBS润洗3-4次,去除残留的乙酸。

(3) 包被好的培养皿可立即使用或晾干后在2-8 ℃储存备用。

表 1 包被液推荐用量表

培养器材培养面积(cm2)50 μg/mL包被液添加量(μL)
96孔板0.3232
48孔板0.880
24孔板1.8180
12孔板3.5350
6孔板9.1910
35mm培养皿9900
60mm培养皿202000
100mm培养皿575700
150mm培养皿15015000

2. 凝胶的制备
 

(1) 不含细胞的凝胶制备(胶原浓度1 mg/mL,体积1mL)(全程在冰上操作)

a) 将Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型、10×PBS、0.1 M NaOH溶液和纯水置于冰上备用。

b) 准备一支无菌的2 mL 离心管置于冰上,在离心管中依次加入冷却的10×PBS(100 μL)、0.1 M NaOH溶液(40 μL)和纯水(660 μL),充分混合。

c) 将200 μL Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型加入上述混合溶液中,混合均匀(混合过程中应轻柔避免产生气泡)。

d) 将配制好的溶液按照表 2凝胶推荐用量添加到不同培养器材中。

 

e) 在CO2培养箱中静置孵育10-30 min,待凝胶完全凝固,用PBS或培养基润洗一遍,然后接种细胞。

(2) 含细胞的凝胶制备(胶原浓度1 mg/mL,体积1mL)(全程在冰上操作)

a) 将Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型、10×PBS、0.1 M NaOH溶液和纯水置于冰上备用。

b) 准备一支无菌的2 mL 离心管置于冰上,在离心管中依次加入冷却的10×PBS(50 μL)、0.1 M NaOH溶液(40 μL)和纯水(210 μL),充分混合。

c) 将200 μL Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型加入上述混合溶液中,混合均匀(混合过程中应轻柔避免产生气泡)。

d) 将500 μL细胞悬液加入上述混合溶液中,混合均匀(混合过程中应轻柔避免产生气泡)。

e) 将配制好的溶液按照表 2凝胶推荐用量添加到不同培养器材中。

a) 在CO2培养箱中进行培养。

 

表 2 凝胶推荐用量表

培养器材培养面积(cm2)凝胶体积(μL)
96孔板0.32100
48孔板0.8200
24孔板1.8400
12孔板3.5800
6孔板9.12000

 

注意事项
 

1. Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型中和后在室温下会迅速成胶,需全程在冰上操作,尽量保持低温。

2. 请在无菌环境下进行操作,避免污染。

3. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

4. 不同厂商的培养板可能在规格上有差别,请根据实际培养面积与需要进行包被。

5. 由于胶原蛋白黏性高,移液时请使用低吸附枪头或前端较粗的移液管。

6. 鼠尾胶原凝胶制备过程中用到的10×PBS、0.1 M NaOH溶液和纯水需用0.22 μm的滤膜过滤保证无菌。

7. 胶原浓度、pH和离子浓度均能显著影响凝胶的强度,建议使用的凝胶中胶原蛋白浓度不小于1 mg/mL。

 

本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!

 


 

(产品包装升级中,以实物为准。)


 

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注意事项

  • 请在保质期内使用本产品
  • 请存放于阴凉干燥处,避免阳光直射
  • 使用前请仔细阅读产品说明书
  • 如有不适,请立即停止使用并咨询专业人士
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