产品信息

产品简介
 

servicebio® SweAgarose NHS-Activated填料是一种预活化的琼脂糖微球，表面被NHS酯修饰，能够直接与含伯胺基的蛋白或多肽进行偶联，用于进一步纯化目标蛋白、抗原和其它小分子。与羧基和氨基填料相比，NHS填料无需EDC/NHS或戊二醛活化，只需将含伯胺基的生物配体溶解在偶联缓冲液中，室温下填料与生物配体混匀1-2h即可偶联成功，具有操作简单、反应条件温和等优点。

产品信息
 

储存与运输
 

冰袋（wet ice）运输；2-8℃保存，12个月有效期。

组成
 

实验准备
 

蛋白偶联相关试剂配方参考如下，用户可根据具体实验情况自行调整

注：偶联液也可选择磷酸盐或硼酸盐等不含伯胺基成分的缓冲液体系。
 

操作步骤（以偶联蛋白为例）
 

1. 蛋白溶液配制：取适量的蛋白用偶联缓冲液溶解，浓度为5-10mg/mL（需提前去除伯胺基成分），配制好的蛋白溶液保存于4℃冰箱中。

2. 蛋白偶联：取500μL填料于1.5mL离心管中，离心，去除上清液；加入1mL预冷的清洗液，混匀后离心，去除上清液，重复此步骤3次；随后立即加入500μL蛋白溶液于离心管中，混匀后，将离心管放置于垂直混匀仪上，室温反应2-4h或4℃过夜。

3. 填料封闭：反应结束后，离心收集上清液，加入500μL封闭液于离心管中，混匀后，将离心管放置于垂直混匀仪上，室温反应2h。

4. 填料保存：反应结束后，离心，去除上清液；加入500μL纯水于离心管中，离心去除上清液，重复操作3次；加入500μL保存液于离心管中，离心去除上清液，重复操作2次；最后加入500μL保存液于离心管中，4℃保存待用。

注意事项
 

1. 本产品对水分敏感，使用时需复温，使用完毕后需立即盖上瓶盖，用封口膜密封后4℃保存。

2. 偶联过程中，需利用透析或脱盐去除缓冲液中带伯胺基的成分，如甘氨酸，BSA，Tris-HCl等。

3. 不同蛋白和抗体与NHS琼脂糖填料的结合能力不同，本说明书提供的数值仅供参考，客户需自行优化偶联时的蛋白浓度。

4. NHS填料在用清洗液清洗后，需立即加入蛋白溶液，防止NHS酯水解。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！