
琼脂糖NHS活化填料(SweAgarose NHS-Activated)
- 5 mL
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
琼脂糖NHS活化填料(SweAgarose NHS-Activated) | Y2262-1ML | 1 mL |
Y2262-5ML | 5 mL |
产品简介
servicebio® SweAgarose NHS-Activated填料是一种预活化的琼脂糖微球,表面被NHS酯修饰,能够直接与含伯胺基的蛋白或多肽进行偶联,用于进一步纯化目标蛋白、抗原和其它小分子。与羧基和氨基填料相比,NHS填料无需EDC/NHS或戊二醛活化,只需将含伯胺基的生物配体溶解在偶联缓冲液中,室温下填料与生物配体混匀1-2h即可偶联成功,具有操作简单、反应条件温和等优点。
产品信息
产品类型 | SweAgarose NHS-Activated |
基质 | 4%琼脂糖微球 |
配体 | NHS酯 |
平均粒径 | 30~150 μm |
偶联量 | >10mg兔IgG/mL填料 |
最大流速 | 0.1MPa,1bar |
pH稳定范围 | 5-10 |
保存液 | 无水异丙醇 |
储存与运输
冰袋(wet ice)运输;2-8℃保存,12个月有效期。
组成
Component Number | Component | G2251-1ML | G2251-5ML |
Y2262 | 琼脂糖NHS活化填料(SweAgarose NHS-Activated) | 1 mL | 5 mL |
说明书 | 1份 | ||
实验准备
蛋白偶联相关试剂配方参考如下,用户可根据具体实验情况自行调整
Component | Reagent combination |
清洗液 | 1mM HCl |
偶联液1 | 100mM MES,pH 5.0 |
偶联液2 | 200mM NaHCO3,pH 8.3 |
封闭液 | 3M 乙醇胺,pH 9.0 |
保存液 | 1*PBS,0.02% proclin-300 |
注:偶联液也可选择磷酸盐或硼酸盐等不含伯胺基成分的缓冲液体系。
操作步骤(以偶联蛋白为例)
1. 蛋白溶液配制:取适量的蛋白用偶联缓冲液溶解,浓度为5-10mg/mL(需提前去除伯胺基成分),配制好的蛋白溶液保存于4℃冰箱中。
2. 蛋白偶联:取500μL填料于1.5mL离心管中,离心,去除上清液;加入1mL预冷的清洗液,混匀后离心,去除上清液,重复此步骤3次;随后立即加入500μL蛋白溶液于离心管中,混匀后,将离心管放置于垂直混匀仪上,室温反应2-4h或4℃过夜。
3. 填料封闭:反应结束后,离心收集上清液,加入500μL封闭液于离心管中,混匀后,将离心管放置于垂直混匀仪上,室温反应2h。
4. 填料保存:反应结束后,离心,去除上清液;加入500μL纯水于离心管中,离心去除上清液,重复操作3次;加入500μL保存液于离心管中,离心去除上清液,重复操作2次;最后加入500μL保存液于离心管中,4℃保存待用。
注意事项
1. 本产品对水分敏感,使用时需复温,使用完毕后需立即盖上瓶盖,用封口膜密封后4℃保存。
2. 偶联过程中,需利用透析或脱盐去除缓冲液中带伯胺基的成分,如甘氨酸,BSA,Tris-HCl等。
3. 不同蛋白和抗体与NHS琼脂糖填料的结合能力不同,本说明书提供的数值仅供参考,客户需自行优化偶联时的蛋白浓度。
4. NHS填料在用清洗液清洗后,需立即加入蛋白溶液,防止NHS酯水解。
产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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