
RNASweAMI™ 原位杂交多重荧光检测试剂盒(IF488-550-647)
- 50 T
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YF019-50T RNASweAMI™ 原位杂交多重荧光检测试剂盒(IF488-550-647)
Component No. | Component name | YF019-50T Sizec | Storaged |
GP-####-1-Aa | Target Probe-[species]-[gene A]-Mix1 | 650 μL | -20℃ |
GP-####-2-Aa | Target Probe-[species]-[gene A]-Mix2 | 650 μL | -20℃ |
GP-####-1-Ba | Target Probe-[species]-[gene B]-Mix1 | 650 μL | -20℃ |
GP-####-2-Ba | Target Probe-[species]-[gene B]-Mix2 | 650 μL | -20℃ |
GP-####-1-Ca | Target Probe-[species]-[gene C]-Mix1 | 650 μL | -20℃ |
GP-####-2-Ca | Target Probe-[species]-[gene C]-Mix2 | 650 μL | -20℃ |
G3719-25UL | A-IF488 probe (200×) | 25 μL | -20℃ |
G3720-25UL | B-IF550 probe (200×) | 25 μL | -20℃ |
G3721-25UL | C-IF647 probe (200×) | 25 μL | -20℃ |
G3708-100ML | 固定液 | 100 mL | 4℃ |
G3709-50ML | 修复液(20×)(pH 6.0) | 50 mL | 4℃ |
G3710-1ML | Proteinase K | 1 mL | -20℃ |
G3711-20ML | 通透剂b | 20 mL | 4℃ |
G3712-50ML | 杂交液 | 50 mL | 4℃ |
G3713-100ML | 20×SSC | 300 mL | 4℃ |
G3714-25ML | DAPI solution | 25 mL | 4℃ |
G3715-25ML | 抗荧光淬灭封片剂 | 25 mL | -20℃ |
a靶标探针货号中####为每一个探针的唯一数字编码,种属简称:Mm=mouse,Hs=human,Rn=rat,Oc=Rabbit,Bt=Bovine,Dr=zebrafish。
b通透剂有效成分为0.5% Triton X-100,针对不同的细胞可进行调整,如需更低浓度的Triton X-100通透处理细胞,可用无核酸酶的1×PBS对通透剂进行稀释后使用。
c整套试剂可以用于检测50个面积约为20 mm×20 mm的组织点,当用于检测的样本面积较大时,每套试剂能完成的实验次数会相应减少。
d所有试剂在存储条件下有效期12个月,整个试剂盒冰袋低温运输。
RNASweAMI原位杂交简介
原位杂交(In situ hybridization),即YSH技术,基本原理是基于碱基互补配对原则,利用特定标记(如荧光素、地高辛等)的已知序列单链核酸作为探针,与待检测的细胞或组织切片中的靶基因(DNA或RNA)特异性结合,二者经碱基互补配对,形成靶基因与标记探针的杂交体。随后根据探针的标记物,利用不同的显色系统对杂交体进行显色及信号放大,从而对靶基因进行精确定量定位。根据探针的标记物不同,有荧光显色系统、DAB显色系统等。
RNASweAMI YSH原位杂交技术检测流程如图1所示,特异性的寡核苷酸探针通过碱基互补配对原则与组织样本中的靶标RNA杂交,然后通过两个“L”型结构(单链DNA)使得靶标处富集大量的信号探针,实现级联式信号放大,经明场或者荧光成像技术,可观察到靶标RNA处形成的明显点状或团簇状信号。相比于传统的原位杂交直标方法,该方法理论上可以将信号放大400-8000倍,实现单分子RNA的可视化,且具有很高信噪比。

本手册提供使用RNASweAMI原位杂交(双标及三标)实验所需的特异性靶标探针(根据用户指定的基因提前设计及合成),荧光信号探针以及荧光信号检测试剂盒的指南和实验方案。
用户自备材料(见下表1所示)
表 1
材料名称 | 推荐供应商或试剂级别或特征 | 货号 | |||||||||
双氧水(30% H2O2) | 分析纯 | —— | |||||||||
无水乙醇 | 分析纯 | —— | |||||||||
二甲苯 | 分析纯 | —— | |||||||||
中性树胶 | YIKE | ||||||||||
超净快干封片胶 | YIKE | Y1415 | |||||||||
苏木素染液 | YIKE | ||||||||||
苏木素分化液 | YIKE | ||||||||||
苏木素返蓝液 | YIKE | ||||||||||
1×PBS,无核酸酶 | YIKE | ||||||||||
无核酸酶水 | YIKE | ||||||||||
抗原修复盒 | YIKE | YGXFHA0019 | |||||||||
24片染色架/载玻片架 | YIKE | YG504-24 | |||||||||
免疫组化笔 | YIKE | ||||||||||
湿盒 | YIKE | WG525 | |||||||||
无酶离心管(各种规格) | 相关产品服务推荐
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