服务介绍：　　

大小鼠，兔子等动物的骨组织，角质化较高的皮肤，致密的韧带，肌腱组织，含有手术线或者含有不是特别硬的支架或材料等的组织无法直接进行石蜡切片。这类样本可直接进行梯度酒精脱水MMA树脂包埋成硬度很高的树脂块，结合后续的硬组织切片机配合钨钢刀片对树脂块进行切片成8-10um左右的切片再进行后续染色，不经脱钙软化处理的树脂包埋切片能够最大限度地保持组织原有结构和形态，不影响后期的染色和结构观察分析。

抗酒石酸酸性磷酸酶染色,又称Trap染色，是用于检测骨、骨细胞中破骨细胞的染色，使破骨细胞呈红色，细胞核浅蓝色，用以显示破骨细胞的分布及数量变化。

硬组织切片所使用的玻片是普通玻璃载玻片，切片厚度比较薄，可以直接用普通的扫描仪进行扫描。该制片方式不适合牙齿，大动物骨组织，含有较硬的材料或者金属材料样本，切出来的效果形态结构会比较碎或者直接不能切片，这时可以选择效果更好的硬组织切磨片技术。

　　实验结果展示：

　　未脱钙大鼠股骨TRAP染色

　　实验流程：

　　组织固定-树脂包埋-硬组织切片-切片脱塑-TRAP染色-脱水封片-显微镜镜检-扫描仪扫描

　　结果判读：

　　破骨细胞呈酒红色或浅红色，细胞核呈浅蓝色。

　　送样运输要求：

组织样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上，4℃保存运输送样。切勿固定时间过长（不宜超过2周），切勿冷冻结冰。

如果是包埋好的树脂块或者组织切片，可以常温运输

注意事项：

1、目前该服务针对硬组织切片，切磨片暂时未开展。

2、硬组织切片的制片方式较多，不同的制片方式可能也会影响染色结果，目前公司的制片方法是梯度酒精脱水，MMA树脂包埋，硬组织切片机切片，切片厚度8-10um。

3、TRAP染色主要是通过组织本身酶的活性来达到染色的目的，但是固定不及时，固定时间太长，或者用酸性固定液固定都可能会影响酶的活性。推荐固定条件：动物处死后10分钟内剥皮去肉，20倍体积中性多聚甲醛（Y1112）固定液常温固定24到48小时，可以在摇床上缓慢摇动，加速固定液渗透。固定完成后可以4℃保存运输送检，不宜在固定液中保存超过2周时间。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！