服务介绍：

免疫荧光多重标记是指在同一张切片上对多种蛋白同时进行标记，从而实现对多种蛋白空间定位、定性及半定量的分析。多重免疫荧光技术是近几年全球热点技术，在肿瘤免疫微环境（TME）、肿瘤治疗、神经科学、干细胞研究、器官移植等多个领域的研究中都是一项非常重要的病理研究技术和手段。

传统TSA多重荧光标记法，由于受到荧光染料光谱波段和显微成像设备的限制，可选择的荧光染料非常有限，通常标记6种及以上蛋白时就会出现相邻波段荧光染料串色的问题，且会受到红细胞，甲醛交联等背景光的干扰。针对这些问题，我司推出的免疫荧光多重标记方法，通过仪器及试剂联合使用去除背景自发荧光和标记荧光、TSA放大技术、抗体洗脱技术、一科荧光扫描仪扫描和多轮扫描图像高精度融合技术等多种优势技术联合使用，可在不限抗体种属的情况下，实现6种及以上蛋白的同时标记，理论上可不限标记的抗体数量。

采用此方法做的多重荧光标记有以下几大优势：

①去除组织内的背景自发光，使标记的阳性信号更特异；

②每轮只标记2种抗体且选择的荧光染料为iF488和iF647，染料光谱波段间隔远不串色；

③通过抗体洗脱液，试剂和荧光去除技术的联合使用，可彻底去除每轮标记的抗体和荧光基团，既良好地保持组织形态结构又不影响后续抗体标记和荧光干扰；

④联合TSA技术，可放大阳性信号，检测更灵敏，且对抗体种属无要求，同源异源抗体都可做；

⑤一科荧光扫描仪全景扫描，分辨率更高，阳性对比更明显，再以DAPI为基准，0.5像素点高精度重合技术对每张切片的多轮扫描结果进行重合处理，得到完整、准确的多标扫描结果；

⑥普通办公电脑上安装一科浏览分析软件Saiviewer，即可浏览且一键分析得到共定位阳性细胞数量，比率，密度等参数，摆脱对高端服务器的硬件要求。

结果展示

1、大鼠 黑质 7标8色结果图

注意事项

1、石蜡切片常温保存运输，冰冻切片-20℃保存运输。

2、细胞爬片、细胞滴片、细胞涂片等样本，因在去除盖玻片过程中会出现细胞脱落的情况、且扫描时不能保证每轮视野扫描结果完全一致，故此类样本不适合使用该多轮荧光标记融合的方法检测。

3、为保证荧光多重标记的效果，客户提供的抗体需做抗体单标检测验证标记效果后再做多标实验。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！