服务介绍：

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，ALP)广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织。ALP是一组同工酶，已发现有 ALP1、ALP2、ALP3、ALP4、ALP5与 ALP6六种同工酶。其中第1、2、6 种均来自肝脏，第3种来自骨细胞，第4种产生于胎盘及癌细胞，而第5种则来自小肠绒毛上皮与成纤维细胞。本实验采用偶氮偶联法来显示碱性磷酸酶，其原理是在pH 9.2～9.8的碱性条件下，细胞内碱性磷酸酶可使萘酚AS-BI磷酸酯水解，释放出磷酸与萘酚，后者与偶联重氮盐生成有蓝色产物，以此证明酶的定位。

正常的骨代谢是通过成骨细胞生长与破骨细胞骨吸收而维持平衡。成骨细胞的标记酶是碱性磷酸酶（ALP）。通常采用ALP碱性磷酸酶染色来直观反应骨组织中成骨细胞的定位及含量变化。骨组织冰冻切片前需经脱钙处理，本染色试剂盒中的ALP染色专用脱钙液经4℃低温脱钙能有效保证ALP染色效果。经本产品染色后，含ALP的成骨细胞呈蓝色，定位于骨小梁边缘和软骨处，细胞核复染为红色。

实验大体流程：

骨组织PFA（Y1112）4℃固定保存一周内（24 h-48 h最佳）——骨组织用我司 EDTA脱钙液（Y1116）4℃低温脱钙——冰冻切片入水——提前配制过滤的ALP染色液染色——水洗——甘油明胶封片。

实验结果展示：

ALP染色-小鼠膝关节

结果判读：

骨组织沿骨膜内整齐排列的矮柱状成骨细胞呈蓝色，软骨处呈蓝色，骨小梁边缘呈蓝色，细胞核呈红色。其他软组织染色后含碱性磷酸酶的细胞呈蓝色，细胞核呈红色。

送样运输要求：

1、做ALP染色的组织需要用PFA（Y1112）4℃固定，固定一周内（24 h-48 h最佳）进行脱钙包埋切片染色。室温固定数小时就会影响酶活，4℃固定超过一周也会影响酶活，导致阳性减弱甚至丢失。

2、做ALP染色的骨组织需要使用本试剂盒中的ALP染色脱钙液或单独采购我司Y1116 EDTA脱钙液4℃低温脱钙。其它脱钙液脱钙的组织，不保证染色结果。用酸性脱钙液脱钙的骨组织，酶失活阳性丢失。建议在我司进行骨组织的脱钙制片和染色全套实验服务。

3、由于高温（尤其是超过60℃）对ALP酶活有很大影响，建议脱钙后的骨组织进行冰冻切片后染色。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！