服务介绍：　　

荧光样本用激光共聚焦显微镜拍摄成像，利用激光的高能量和聚焦特性，可以获得更高分辨率、更高对比度的显微图像。我司配备徕卡超高分辨率白激光共聚焦显微镜STELLARIS 5及尼康共聚焦显微镜NIKON Eclipse Ti。

共聚焦送样单.docx

徕卡STELLARIS 5超高分辨率白激光共聚焦显微镜技术参数：

1、白激光波长范围485-685nm，201根谱线连续可调，可同时调出8根谱线，每种染料均可使用100% 峰值激发，荧光更亮，淬灭更少，最大程度减少荧光串色。

2、物镜配置：10× 、 20× 、 40× 、 63×(油镜) 。

3、分辨率：常规共聚焦confocal高分辨模式：XY方向 260nm，Z方向 600nm；超高分辨Lightning成像模式：XY方向 120nm，Z方向 200nm。超高分辨率Lightning成像模式尤其适用于拍摄细胞器（线粒体，溶酶体，细胞骨架等），树突棘等精细结构的观察。分辨率更高，图像更清晰，细节更清楚，共定位分析更准确。

4、适用样本类型：可用于拍摄普通切片免疫荧光单双多标、大组织双宽玻片免疫荧光单双多标、带荧光的骨硬组织切片和切磨树脂片（动物注射的钙黄绿素、茜素红、四环素等荧光物质观察骨生长情况）、专用共聚焦孔板细胞免疫荧光（底部为0.17nm玻璃材质）、共聚焦专用小皿细胞，类器官，细胞球免疫荧光等多种类型的荧光样本。普通塑料底细胞培养板只能在10×物镜下拍摄。

5、成像内容及优势：

①免疫荧光多色高分辨率confocal成像和超高分辨率Lightning成像（结合后续荧光染料的搭

配，理论上可以拍十几色或更多色）。

②荧光寿命的TauSense成像，光谱拆分成像去除弹力纤维自发光，红细胞自发光，甲醛固定引起的背景自发荧光，植物叶绿体自发光等各种自发光的干扰。

③厚组织切片（振动切片，冰冻切片，硬组织切磨树脂片），细胞爬片，类器官，细胞球3D立体成像（厚100μm），可展示不同切面信息。

④明场立体微分干涉相差成像（DIC），可提高组织细胞明场反差，生成立体浮雕图更清楚显示组织明场结构，且可与荧光图叠加，在明场组织结构上观察荧光信号。

⑤活细胞半小时内动态拍摄（未配备细胞培养系统只能在短时内拍摄成像）。更温和的激发，确保活细胞无损观察，如细胞分裂、细胞生长、凋亡，细胞运动，蛋白运动，细胞吞噬等动态过程。

⑥组织大视野全景扫描拼接成像。Navigator可做全视野、多色多焦点扫描拼图，多孔板多点定位自动扫描成像并拼接成组织全景图像，便于观察整个组织结构及荧光分布情况。可用于在细胞群中快速找到表达荧光的细胞，在细胞中找共定位细胞，在组织中找病变区域，快速扫描大组织等。徕卡22mm视野直径拼图扫描，可大大节省扫描拼图时间，减少荧光激发照射时间，减少荧光淬灭。

⑦未知染料发射光光谱扫描，用于荧光染料的开发研究，组织自发光的光谱图检测。

一科徕卡共聚焦离线版操作流程.pdf

徕卡离线版软件链接：

安装前，先关闭杀病毒软件，优先推荐使用 链接1 版本安装，如果电脑限制，安装失败，就使用 链接2 版本安装。

链接1：https://pan.baidu.com/s/13Pe3uHZB_cNTbx9VG_TYUw

提取码：zrmy

链接2：https://pan.baidu.com/s/1mzp2mBFJPV9UYxzKMS33zw

提取码：t8a6

　　实验结果展示：　　

活细胞线粒体荧光探针（Y1734）+溶酶体荧光探针（Y1733）标记

实验流程：

　　(1)样片接收：专用共聚焦孔板（底部为0.17nm玻璃材质）或共聚焦专用小皿荧光探针，荧光药物，荧光染料等标记的活细胞带培养基常温运输。实验前需填写送样单上倍数，视野，客户自备荧光染料请提供荧光激发波长及发射波长等信息。

　　(2)实验步骤：按客户指定的要求选择相应视野的细胞和拍摄时间（半小时内）进行拍摄

　　(3)实验结果：1个拍摄视频，LIF原始图及TIF导出图。

　　送样运输要求：

　　因本仪器未配备细胞培养系统，无法长期保存活细胞，超过半小时细胞状态不佳。建议客户在我司培养细胞并做荧光标记后立即送样拍摄。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！